RIP
发布日期:2022-03-16 17:39:24 浏览次数:
原理: RIP(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),它能识别在体内细胞环境中DNA的目标DNA结合蛋白。RIP可以用来识别特定的RNA分子(多种)与特定的核或胞质蛋白之间的相互作用。这些实验包括免疫共沉淀内源生成的RNA结合蛋白免疫复合物和与RNA结合蛋白相互作用的任何一种独立的RNA。这些RNA种类的提纯使得能够鉴定和识别mRNA (以及与它们相关的潜在非编码RNA)并且可以直接用各种实验验证,包括定量RT-PCR、基因芯片(RIP-chip)和深度测序或2 代测序基础平台(RIP-Seq)。
应用:
RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用,但由于研究对象是RNA-蛋白复合物而不是DNA-蛋白复合物。95%的人类基因组并不编码基因,而是产生大量的非编码RNA,真正编码蛋白质的基因只占人类总基因组的约2%。这些非编码RNA在生命的生长发育的各个阶段都发挥着重要的调节作用,与艾滋病、白血病、糖尿病、畸形等多种病变密切相关,并且参与着干细胞和表观遗传学调控。而RNA-蛋白复合物驱动了几乎所有细胞过程的基因表达的转录后调控,包括剪接(splicing)、出核转运(nuclear export)、mRNA 稳定性以及蛋白转译过程,因此,对基因调控的了解就有赖于确定这些过程中RNA的结合的变化。因此,RNA研究也被越来越多的科学家重视起来,目前已经成为生命科学研究中一个炙手可热的领域,而RIP技术也逐渐成为RNA研究领域的一项常规方法,帮助我们了解越来越受关注的转录后调控网络。